新生小鼠Sca-1+心脏干细胞的分离与鉴定

作者：韦静; 吴成强; 桂春

来源：广西医科大学学报, 2018, 35(05): 648-651.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2018.05.015

• 新生小鼠
• Sca-1+心脏干细胞
• 干细胞抗原1
• 磁珠分选
• 流式细胞术
• 鉴定

目的:分离、纯化新生小鼠干细胞抗原-1(Sca-1)阳性心脏干细胞,观察其特异性标记物。方法 :将新生小鼠的心脏剪碎后用Ⅱ型胶原酶及胰酶反复消化。组织法培养1014d后结合免疫磁珠进行阳性分选出Sca-1+心脏干细胞。分选纯化后的细胞通过流式细胞术和免疫荧光的方法进行Sca-1的鉴定,并通过免疫荧光的方法鉴定心源性转录因子GATA-4和Nkx-2.5的相关蛋白。结果:组织培养和磁珠分选法结合成功分离并纯化了小鼠Sca-1+心脏干细胞。分选后流式结果显示Sca-1+心脏干细胞可达(62.8±1.3)%。免疫荧光显示Sca-1、GATA-4及Nkx-2.5均为阳性表达。结论:组织培养结合磁珠分选能成功分离纯化新生小鼠Sca-1+心脏干细胞,且能稳定培养。细胞表达心源性转录因子相关蛋白GATA-4及Nkx-2.5。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院