曲古抑菌素A对食管鳞癌细胞迁移影响机制探讨

作者：刘丹辉; 刘玉珍; 陈彦民; 陈智; 赵宝生^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2020, 27(05): 345-352.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.05.03

• 组蛋白去乙酰化酶抑制剂
• 曲古抑菌素A
• NF-κB
• 上皮-间质转化
• 迁移
• 食管鳞癌细胞

目的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACIs)是一类新型的抗肿瘤药物,抑制食管鳞癌细胞增殖并促进其凋亡,但对食管鳞癌细胞迁移的影响及机制尚不清楚。本研究旨在探讨HDACIs曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对食管鳞癌细胞迁移能力的影响及其可能的机制。方法培养食管鳞癌细胞KYSE-150和EC9706。单独TSA以及联合NF-κB抑制剂BAY 11-7082、PI3K/Akt信号通路阻断剂LY 294002对食管鳞癌细胞进行处理,Transwell法检测食管鳞癌细胞迁移能力,分为NC组(对照组)、TSA组(200nmol/L TSA组)、BAY组(10μmol/L BAY 11-7082组)、TSA+BAY组(200nmol/L TSA+10μmol/L BAY 11-7082组)、LY组(10μmol/L LY 294002组)和TSA+LY组(200nmol/L TSA+10μmol/L LY 294002组)。蛋白质印迹法检测TSA处理后Vimentin、p-p65和p-Akt等蛋白的表达水平,以及TSA联合BAY、LY后Vimentin、p-p65、p-Akt等蛋白的表达情况。多组间均值差异比较采用两因素析因方差分析,两独立组比较采用t检验。结果 Transwell实验结果表明,TSA处理食管鳞癌细胞24h后细胞迁移能力增加,与对照组比较,KYSE-150细胞中,差异有统计学意义,t=13.687,P<0.01;EC9706细胞中,差异有统计学意义,t=11.917,P<0.01。TSA+BAY组与TSA组比较,迁移能力减弱,KYSE-150细胞中,F=169.896,P<0.01;EC9706细胞中,F=248.813,P<0.01。TSA+LY组与TSA组比较,迁移能力减弱,KYSE-150细胞中,F=56.019,P<0.01;EC9706细胞中,F=93.108,P<0.01。蛋白质印迹实验结果表明,TSA使KYSE-150细胞中Vimentin(t=13.156,P<0.01)、Slug(t=43.866,P<0.01)、p-p65/p65(t=28.866,P<0.01)以及EC9706细胞中Vimentin(t=43.565,P<0.01)、Slug(t=20.810,P<0.01)、p-p65/p65(t=73.525,P<0.01)蛋白表达水平升高,TSA+BAY组与TSA组比较,使KYSE-150细胞中Vimentin(F=49.376,P<0.05)、Slug(F=19.636,P<0.05)、p-p65/p65(F=19.636,P<0.05)以及EC9706细胞中Vimentin(F=14.297,P<0.05)、Slug(F=77.817,P<0.05)、p-p65/p65(F=14.137,P<0.05)蛋白表达水平降低;TSA+LY组与TSA组比较,使KYSE-150细胞中Vimentin(F=110.413,P<0.05)、Slug(F=19.636,P<0.05)、p-p65/p65(F=59.929,P<0.05)、p-pAkt/Akt(F=184.615,P<0.05)以及EC9706细胞中Vimentin(F=94.270,P<0.05)、Slug(F=77.817,P<0.05)、p-p65/p65(F=54.267,P<0.05)、p-pAkt/Akt(F=100.043,P<0.05)蛋白表达水平降低。结论 TSA通过激活PI3K/Akt信号通路,进而调节下游信号分子NF-κB亚基p65,促进食管鳞癌细胞迁移。

• 单位
  新乡医学院第一附属医院; 新乡医学院