摘要
目的揭示Iws1在小鼠胚胎干细胞分化发育中的作用。方法利用CRISPR-Cas9基因编辑建立稳定敲除Iws1的小鼠胚胎干细胞细胞系后,利用悬滴法诱导培养拟胚体(embryoid body, EB),在体外探究该基因是否会影响中胚层的发育。同时分离分别出生1天、7天、21天、56天的小鼠心肌细胞进行该基因的定量检测。并使用GeneMANIA数据库确定该基因的潜在靶标。此外,使用WebGestalt进行基因功能(gene ontology, GO)与信号通路(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)富集分析。结果在小鼠胚胎干细胞诱导分化体系中,Iws1敲除抑制EB中胚层的发育。该基因在出生后21天的小鼠心肌细胞表现出高表达。Iws1具有19种潜在靶向基因。GO和KEGG分析表明,这些潜在靶基因与氧化还原反应,C型瘦蛋白受体信号通路和其他生理过程有关。结论 Iws1参与小鼠胚胎干细胞中胚层分化,可能潜在调控中胚层源性终末分化器官的发育。
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单位中国医学科学院阜外医院; 中国医学科学院北京协和医学院; 国家心血管病中心