在东方拟无枝酸菌中建立I-SceI内切酶介导的无标记敲除系统

作者：朱丽; 饶敏; 罗敏玉

来源：中国抗生素杂志, 2015, 40(05): 330-333.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.005538

• I-SceI内切酶
• 东方拟无枝酸菌
• ECO-0501
• hemA2

目的在东方拟无枝酸菌中建立由I-Sce I介导的无标记高效重组系统。方法首先构建可用于东方拟无枝酸菌的I-Sce I操作盒,通过敲除多烯类化合物ECO-0501合成相关基因hem A2,比较操作盒使用前后获得hem A2基因双交换突变株的效率。结果在没有引入I-Sce I的情况下,随机重组的发生几率仅约2%,而导入后,由于I-Sce I酶对引入DNA位点的双链切割,导致双交换重组的发生率提高至90%以上。结论 I-Sce I系统是一种可用于东方拟无枝酸菌无标记遗传操作的有效工具。

• 单位
  上海交通大学; 上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司