BRAF在10-姜酚抗黑色素瘤中作用的分子模拟及实验研究

作者：张竞之; 邓波; 江小梨; 张双伟; 蔡敏; 刘彬^*

来源：中国病理生理杂志, 2018, 34(12): 2166-2171.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2018.12.009

• 10-姜酚
• 黑色素瘤
• 细胞活力
• BRAF蛋白
• 分子模拟

目的:采用分子模拟技术及细胞实验研究BRAF蛋白在10-姜酚(10-G)抗黑色素瘤中的作用。方法:将10-G(10、20和40μmol/L)刺激人皮肤黑色素瘤A375细胞24 h,采用MTS法和细胞计数检测细胞活力。采用分子对接及分子动力学模拟分析10-G与BRAF蛋白之间的相互关系。采用Western blot技术检测p-BRAF、总BRAF、p-MEK1/2、p-ERK1/2和p-P38的蛋白水平。结果:10-G可剂量依赖性地降低A375细胞活力和数量,与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 01)。10-G与野生型BRAF之间的结合能为-7. 358 kcal/mol,与V600E突变型的BRAF之间的结合能为-8. 255 kcal/mol。分子动力学模拟证实BRAFV600E与10-G之间的结合是稳定的。10-G能显著抑制A375细胞中p-BRAF、p-MEK1/2和p-P38的蛋白水平(P <0. 01),对p-ERK1/2的蛋白水平没有影响。结论:10-G能够抑制黑色素瘤细胞的生长,其机制可能与抑制BRAF激活有关。

• 单位
  广州医科大学附属第二医院; 香港浸会大学深圳研究院