牛肝谷氨酸脱氢酶的分离纯化及部分酶学性质

作者：**; 傅婷; 万骥; 唐云明

来源：食品科学, 2015, 36(13): 178-183.

• 牛肝
• 谷氨酸脱氢酶
• 分离纯化
• 酶学性质

取新鲜牛肝,经匀浆、缓冲液抽提、正丁醇脱脂、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得了电泳纯的牛肝谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)。经过纯化后的结果:GDH的酶比活力为306.06 U/mg,纯化倍数为93.60倍,酶活回收率为23.12%。GDH的分子质量为380.2 k D,亚基分子质量约为61.7 k D。酶学性质研究结果表明:GDH的最适反应温度为50℃,在温度为30℃以下时较稳定;最适反应p H值为8.2,该酶对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)的Km值为0.696 mmol/L。甲醇、乙醇、异丙醇、Cd2+、Co2+、Ca2+、Ag+、Pb2+、Zn2+、Cu2+对该酶具有抑制作用,低浓度Ba2+、Mg2+、K+、Li+与乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)对其具有一定的激活作用。

• 单位
  三峡库区生态环境教育部重点实验室; 西南大学; 生命科学学院