RNAi介导的CK2α基因沉默对喉癌细胞上皮间质转化过程的影响

作者：张芳; 杨博; 杜莉; 姜学钧

来源：实用医学杂志, 2018, 34(08): 1253-1257.

• 人喉癌上皮细胞
• 蛋白激酶CK2α
• 侵袭转移
• 上皮间质转化

目的探讨人喉癌Hep-2细胞稳定转染干扰质粒后,蛋白激酶CK2α表达对其上皮间质转化过程的影响。方法应用体外构建的干扰质粒pGCsi-H1-CK2α稳定转染人喉癌上皮细胞Hep-2,分为未转染组(parental)、对照质粒转染组(pGCsi-H1-control)和干扰质粒转染组(pGCsi-H1-CK2α)。转染24 h后经G418筛选出稳定转染的细胞系,应用Real-time PCR和Western blot进行鉴定;采用Transwell小室检测转染后Hep-2细胞的侵袭和迁移能力;使用相差显微镜观察各组细胞形态并通过Western blot检测细胞上皮标志物E-cadherin、vimentin及转录因子slug、snail的表达。结果干扰质粒转染组中CK2α基因在m RNA和蛋白水平的表达明显低于未转染组及对照质粒转染组(P<0.01)。Transwell实验显示稳定敲低CK2α阻止了Hep-2细胞的迁移与侵袭。与未转染组及对照质粒转染组相比,干扰质粒转染组中的E-cadherin的表达增加,但是snail、slug和vimentin的表达下降。结论 RNAi介导的CK2α抑制表达抑制了喉癌细胞上皮间质转化过程。

• 单位
  中国医科大学附属第四医院; 中国医科大学附属第一医院