猪圆环病毒2型RPA恒温扩增检测方法的建立及初步应用

作者：黄超华; 张全红; 曹琛福; 王潇; 林彦星; 史卫军; 花群义^*

来源：中国兽医杂志, 2018, 54(07): 46-125.

• 猪圆环病毒2型
• 重组酶聚合酶恒温扩增
• 检测方法建立

利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),以猪圆环病毒2型Cap基因的保守序列为靶序列设计并筛选出一组特异性的引物和探针,建立了快速检测猪圆环病毒2型核酸的RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)核酸检测结果均为阴性,灵敏性高,最低可检出核酸浓度为0. 87×10-4ng/μL,简单快速,且重复性好。利用所建立的RPA方法对183份临床样品进行检测,结果与实时荧光PCR方法符合率为98. 9%。本研究为猪圆环病毒2型核酸的快速检测提供了一种新方法,尤其适合基层实验室或养猪场的快速检测。

• 单位
  国家知识产权局; 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心