miR-144-5p靶向WNT5a对山羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响

作者：刘杰; 许香萍; 邓铭; 邹娴; 江声伟; 刘德武; 柳广斌; 孙宝丽; 郭勇庆; 李耀坤

来源：畜牧兽医学报, 2023, 54(06): 2421-2435.

DOI：10.11843/j.issn.0366-6964.2023.06.021

• 颗粒细胞
• miR-144-5p
• WNT5a
• 山羊
• 繁殖

旨在探究miR-144-5p靶向WNT5a对山羊颗粒细胞增殖和凋亡的影响。本研究选用2岁健康雷州母山羊的卵巢颗粒细胞来过表达和抑制表达miR-144-5p及WNT5a,通过荧光定量PCR(real-time qPCR, RT-qPCR)、Western blot、双荧光素酶报告基因、CCK-8等技术来探究miR-144-5p与WNT5a对颗粒细胞增殖和凋亡的影响。结果表明，miR-144-5p在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著高于小卵泡颗粒细胞(P<0.01),WNT5a在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著低于小卵泡颗粒细胞(P<0.01);CCK-8检测发现，miR-144-5p抑制了GCs增殖，过表达miR-144-5p后，抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白表达极显著下调(P<0.01),促凋亡基因BAX的mRNA和蛋白表达极显著上调(P<0.01);Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著降低(P<0.01);另外，miR-144-5p能靶向WNT5a抑制其表达。同时，CCK-8检测结果表明，WNT5a可促进GCs增殖，过表达WNT5a后，抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白水平极显著上调(P<0.01),促凋亡基因BAX的mRNA显著下调(P<0.05)、蛋白水平极显著下调(P<0.01),Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著提高(P<0.01)。综上所述，在GCs中，miR-144-5p靶向负调控WNT5a的表达，调控Wnt/β-Catenin通路，进而上调BAX/BCL-2的比值来抑制颗粒细胞增殖并促进其凋亡，这可能对山羊的排卵数和产羔数产生一定的影响。

• 单位
  广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室; 广东省农业科学院动物科学研究所; 华南农业大学