核糖体工程技术选育米尔贝霉素高产菌株

作者：鲁凤娟; 侯燕燕; 李晓广; 何林凌; 褚以文; 夏海洋; 田永强^*

来源：中国抗生素杂志, 2018, 43(07): 811-816.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.006299

• 核糖体工程
• 复合诱变
• 链霉素
• 米尔贝霉素

本实验室中保存的一株从土壤中分离得到的米尔贝链霉菌(Streptomyces milbemycinicus)27号菌株所产米尔贝霉素A3和A4的初始产量分别为61.0和23.8μg/m L。以该菌株为出发菌株,采用核糖体工程技术,结合紫外诱变技术,对米尔贝霉素产生菌米尔贝链霉菌进行诱变,并以链霉素耐受为筛选压力进行筛选。经过诱变后对单菌落进行摇瓶复筛,其中正突变株中米尔贝霉素产量最高的菌株编号是R2-6-5,其米尔贝霉素A3和A4的产量分别是105.2和38.8μg/m L,较原始菌株分别提高了72.5%和63.3%,且遗传稳定。最后,对产量变化较大的11株突变株基因组中rsm G基因和rsp L基因进行突变位点分析,发现在rsp L基因内均未发生突变,rsm G基因均发生突变。本研究表明,链霉素抗性降低的突变菌株确实都在相关基因内发生突变,且核糖体工程结合紫外诱变的诱变方式效果良好,能够快速有效的提高米尔贝链霉菌生物合成米尔贝霉素的能力。

• 单位
  中国科学院; 四川大学; 成都大学; 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所; 上海生命科学研究院植物生理生态研究所