重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达

作者：李素霞; 袁勤生

来源：食品与药品, 2008, (11): 5-7.

• 羧肽酶原B
• 甲醇酵母
• 表达
• 多克隆抗体制备
• 蛋白质印迹 procarboxypeptidase B
• Pichia pastoris
• expression
• polyclonal antibody preparation
• Western-blotting

目的构建重组羧肽酶原B甲醇酵母工程菌株。方法将羧肽酶原B编码基因整合入酵母质粒,电转化至甲醇酵母中,His缺陷培养基和G418抗性筛选获得阳性克隆株。用大肠杆菌表达的羧肽酶原B免疫家兔制备羧肽酶原B兔抗血清;经发酵、甲醇诱导后,蛋白质印迹(Western-blotting)免疫检测蛋白质的表达。结果获得高抗体滴度的羧肽酶原B兔抗血清,蛋白质印迹免疫检测重组酵母经甲醇诱导表达后的上清阳性。结论获得了重组羧肽酶原B甲醇酵母工程菌株,可分泌表达重组羧肽酶原B。

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室