桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞EMT的抑制作用及其机制

作者：孙妍; 李清初^*; 谷翠芝; 葛汝村; 孟凡华; 毕慧欣

来源：山东医药, 2022, 62(26): 41-44.

• 桂枝去桂加茯苓白术汤
• 上皮—间充质转化
• 转化生长因子β1
• Smad3
• 丝裂原激活的蛋白激酶
• 肾脏纤维化

目的 观察桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞上皮—间充质转化（EMT）的影响，并探讨其作用机制。方法 取雄性SD大鼠40只，随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组各10只，其中低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予桂枝去桂加茯苓白术汤5、10、20 g/（kg·d）灌胃，空白对照组给予等体积生理盐水灌胃，连续7 d。腹主动脉采血，取上清。将HK-2细胞分为5组，空白对照组加入空白对照组大鼠血清；TGF-β1组加入5 ng/mL TGF-β1；低浓度含药血清干预组先加入低剂量组大鼠含药血清后，再加入5 ng/mL TGF-β1；中浓度含药血清干预组先加入中剂量组大鼠含药血清后，再加入5 ng/mL TGF-β1；高浓度含药血清干预组先加入高剂量组大鼠含药血清后，再加入5 ng/mL TGF-β1；各组均培养48 h。采用Western blotting法检测各组细胞EMT标志蛋白E-cadherin、α-SMA、Vimintin蛋白表达，MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38、JNK及其磷酸化水平，Smad3信号通路中Smad3及p-Smad3蛋白表达。结果 与空白对照组比较，TGF-β1组α-SMA、Vimintin蛋白表达升高，E-cadherin蛋白表达降低（P<0.05或<0.01）；与TGF-β1组比较，低浓度含药血清干预组E-cadherin及α-SMA蛋白表达差异无统计学意义；中浓度及高浓度含药血清干预组α-SMA、Vimintin蛋白水平降低，E-cadherin蛋白表达升高（P<0.05或<0.01）。与空白对照组比较，TGF-β1组ERK1/2、JNK、P38、Smad3蛋白磷酸化水平均升高（P均<0.05）；与TGF-β1组比较，低浓度含药血清干预组p38蛋白磷酸化水平降低，中浓度含药血清干预组JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平降低，高浓度含药血清干预组ERK1/2、JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平均降低（P<0.05或<0.01）。结论 桂枝去桂加茯苓白术汤能够抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞EMT过程，其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad3、TGF-β1/MAPK信号通路的激活有关。

• 单位
  桂林医学院附属医院