胃癌相关基因GCRG 213正反义表达重组腺相关病毒载体的构建

徐世平; 吴本俨; 王孟薇; 高利利; 伍银桥; 蒋立新; 王卫华; 尤纬缔

摘要

目的构建胃癌相关基因OCRG 213正、反义表达重组腺相关病毒载体,制备相应的重组腺相关病毒。方法通过引入限制性内切酶识别位点从pGEM-T质粒上扩增出胃癌相关基因GCRG 213的DNA片段,按正、反向克隆入pCMV-MCS载体,测序正确后用NotI酶切,克隆入pAAV-MCS载体,单、双酶切鉴定后,同pAAV-Helper、pAAV- RC质粒用磷酸钙转染法共转染AAV-293细胞制备病毒。结果成功构建包含胃癌相关基因GCRG213正、反义克隆的重组腺相关病毒载体,并制备出滴度为4×1010v．g．／ml腺相关病毒。结论载体的构建和病毒制备为进一步研究GCRG 213的体内功能打下了基础。

单位
解放军总医院; 本元正阳基因技术有限公司

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更新时间：2021-01-21 06:31

胃癌相关基因GCRG 213正反义表达重组腺相关病毒载体的构建

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