摘要
目的探讨RNA干扰技术抑制蛋白激酶CK2α表达后,喉癌细胞Hep-2对顺铂敏感性的变化。方法构建蛋白激酶CK2α特异性siRNA表达质粒psiRNA-hH1neo-CK2α和非特异性表达质粒psiRNA-hH1neo-cont,脂质体转染法转染Hep-2细胞。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测转染后Hep-2细胞蛋白激酶CK2α mRNA和蛋白表达。设立正常对照组、顺铂(5μg/ml)组、psiRNA-hH1neo-CK2浕组和psiRNA-hH1neo-CK2α+顺铂(5μg/ml)组,应用MTT法检测转染后Hep-2细胞对顺铂敏感性的变化。结果psiRNA-hH1neo-CK2α特异性地抑制了Hep-2细胞中蛋白激酶CK2α mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。顺铂组(5μg/ml)及psiRNA-hH1neo-CK2浕组Hep-2细胞的增殖能力分别为正常对照组的(55.32±4.68)%和(49.68±5.33)%(P<0.05),但均高于二者联合组(26.12±5.51)%(P<0.05),转染psiRNA-hH1neo-CK2浕后,Hep-2细胞对顺铂敏感性增加了2.12倍。结论RNA干扰技术抑制蛋白激酶CK2浕表达能增加喉癌细胞Hep-2对顺铂的敏感性。
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单位首都医科大学; 北京朝阳医院; 首都医科大学附属北京同仁医院