脊髓背角神经元miR-9在糖尿病神经痛大鼠钙稳态调节蛋白1过表达中的作用

作者：刘文捷; 姜军; 李安超; 何万友; 胡啸玲; 郭曲练

来源：中华麻醉学杂志, 2017, 37(08): 954-957.

• 微RNAs
• 钙通道
• 脊髓
• 神经元
• 糖尿病
• 神经痛

目的评价脊髓背角神经元微小RNA9(miR-9)在糖尿病神经痛大鼠钙稳态调节蛋白1(CALHM1)过表达中的作用。方法健康雄性SD大鼠93只,2月龄,体重180200 g,采用腹腔注射1%链尿佐菌素(STZ)60 mg/kg的方法制备大鼠糖尿病模型。实验Ⅰ采用随机数字表法分为2组:正常对照组(C组,n=10)和糖尿病神经痛组(DNP组,n=83)。分别于STZ注射前、注射后1、2、3、4、5、6周时测定机械缩足反应阈(MWT);于STZ注射后6周时采用原位杂交法测定脊髓背角miR-9表达。实验ⅡSTZ注射后6周时取糖尿病神经痛大鼠,分离、培养脊髓背角神经元,以5×106个/ml的密度接种于培养孔(2 ml/孔),采用随机数字表法分为2组(n=18):对照组(C组)和miR-9反义寡核苷酸组(ASO组)。ASO组加入miR-9反义寡核苷酸的单链核苷酸序列:5’-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3’,终浓度为100 pmol/L。于孵育48 h时采用qRT-PCR法测定miR-9和CALHM1 mRNA的表达,于孵育72 h时采用Western blot法测定CALHM1的表达。结果实验Ⅰ与C组比较,DNP组STZ注射后26周时MWT降低,脊髓背角miR-9表达上调(P<0.05)。实验Ⅱ与C组比较,ASO组脊髓背角神经元miR-9、CALHM1及其mRNA表达下调(P<0.05)。结论脊髓背角神经元miR-9可能介导了糖尿病神经痛大鼠CALHM1的过表达。

• 单位
  中南大学湘雅医院; 南华大学附属第一医院; 佛山市第一人民医院