氧化低密度脂蛋白通过氧化应激介导的MKKs/p38信号通路诱导巨噬细胞炎症反应

作者：闵宁斌; 张少华; 刘仲伟; 项羽^*

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(10): 1392-1398.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.10.011

• 氧化低密度脂蛋白
• 巨噬细胞
• 活性氧簇
• p38 MAPK信号通路
• 炎症反应

目的探讨MKKs/p38信号通路在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人巨噬细胞炎症反应中的作用。方法分别以浓度为25,50,100μg/ml的ox-LDL刺激人THP-1巨噬细胞,并设立正常对照组。以p38 MAPK特异性抑制剂SB203580对人THP-1巨噬细胞内p38 MAPK进行抑制;分别用MKK3-siRNA及MKK6-siRNA使人巨噬细胞内MKK3及MKK6沉默,DCFH-DA免疫荧光测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平,总抗氧化力(TAC)评估细胞内抗氧化能力; ELISA法检测细胞培养上清液中白介素-18(IL-18)及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法测定细胞内MKK3、MKK6以及p38 MAPK磷酸化水平,IL-18及TNF-α表达水平。结果与正常对照相比,ox-LDL刺激THP-1细胞内ROS生成水平显著升高,TAC水平显著降低(P <0. 05);细胞培养上清液及细胞内IL-18及TNF-α水平显著升高(P <0. 05);细胞内MKK3、MKK6以及p38MAPK磷酸化水平显著上调(P <0. 05)。上述变化均具有ox-LDL浓度依赖性(P <0. 05)。与ox-LDL刺激后相比,SB203580处理显著抑制p38 MAPK磷酸化水平(P <0. 05);与ox-LDL刺激后相比,特异性的小干扰RNA能够显著降低MKK3及MKK6的表达水平(P <0. 05)。SB203580及小干扰RNA处理能够显著降低ox-LDL诱导的IL-18及TNF-α表达(P <0. 05),而对其诱导的ROS水平增高及TAC水平降低无明显影响(P> 0. 05)。结论 ox-LDL可增加巨噬细胞内ROS的产生,激活MKKs/p38 MAPK信号通路,进而诱发炎症反应。

• 单位
  陕西省人民医院