2型糖尿病雄性小鼠生殖细胞形态学改变及凋亡机制研究

作者：李冲; 谢曦; 王雅茹; 刘瑜; 刘影; 牛文彦

来源：重庆医科大学学报, 2023, 48(11): 1331-1336.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003368

• 2型糖尿病
• 睾酮
• 生精功能

目的：通过构建2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）雄性小鼠模型探究2型糖尿病对睾丸组织形态学、睾酮分泌、精子生成等方面的影响。方法：将24只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为2组：对照组10只和T2DM组14只。对照组小鼠基础饲料喂养，T2DM组给予高脂喂养。8周后对照组小鼠腹腔注射柠檬酸盐缓冲液，T2DM组小鼠腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素（streptozocin,STZ），持续5 d。饲养小鼠4周后断颈处死，分离出小鼠的血清、睾丸、附睾。通过精子计数、睾酮水平检测评估雄性小鼠生殖细胞生精功能；HE染色分析睾丸组织形态学变化；TUNEL染色检测睾丸生殖细胞的凋亡情况。ELISA检测雄性小鼠血清中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)水平；Western blot检测雄性小鼠睾丸组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,BaX）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)蛋白表达水平。结果：与对照组相比，T2DM组小鼠体质量（26.00±2.85） g、精子数目（4.15±1.01）×10～6个/L、睾酮水平（0.99±0.41） ng/mL均降低（P=0.000,P=0.009,P=0.041）;TUNEL结果显示：T2DM组小鼠睾丸生精小管各级生精细胞都有不同程度的凋亡，凋亡细胞数量（21.60±5.11,P=0.033）增加；ELISA结果显示：T2DM组小鼠血清氧化应激SOD(4.42±0.47) pg/mL和HO-1(2 968.00±536.10) pg/mL表达水平增加（P=0.000,P=0.008）。Western blot检测发现BaX(1.270±0.059)、Caspase-3(1.94±0.47)蛋白表达水平增加（P=0.008,P=0.041），且BaX与Bcl-2比值增大。结论：2型糖尿病雄性小鼠血清睾酮含量显著降低，生精细胞凋亡增加，成熟精子数量减少，影响生殖能力。

• 单位
  天津医科大学