CD40配体刺激人外周血来源B细胞的长期培养及增殖活化

作者：吴超; 刘勇; 赵琪; 陈广梅; 陈军浩; 严晓敏; 周乙华; 黄祖瑚

来源：中华医学杂志, 2009, 89(2): 124-127.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.02.015

• B淋巴细胞
• CD40配体
• 抗原提呈细胞
• 肝炎核心抗原
• 乙型

目的 建立外周血来源B细胞体外长期培养体系,观察培养过程中B细胞的增殖活化及抗原提呈功能.方法 利用重组人可溶性CD40配体(sCD40L)刺激人外周血B细胞的长期培养过程中,流式细胞技术检测B细胞DNA周期及B细胞表面CD80、CD86、主要组织相容复合物(MHC)Ⅰ类及Ⅱ分子的表达状况;观察B细胞增殖情况及B细胞活化后表面分子的表达.采用乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)-异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗原多肽与B细胞共孵育,检测B细胞对抗原多肽的负载能力.结果 人外周血B细胞在sCD40L培养体系中可长期培养达50 d,在此期间,B细胞绝对计数增加近10倍,外周血B细胞比例由8.21%增高到70.67%,活化的B细胞高表达CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ,并可负载HBV核心抗原肽.结论 sCD40L培养体系可在体外长期培养人外周血B细胞,并使B细胞增殖活化,具有抗原提呈细胞的特征.

• 单位
  南京医科大学第一附属医院; 南京医科大学