禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定

作者：贠炳岭; 李德龙; 胡晓亮; 刘在斯; 秦立廷; 吴关; 刘文; 祁小乐; 王永强; 高宏雷; 高玉龙; 王笑梅

来源：中国预防兽医学报, 2012, (10): 782-785.

• 禽白血病病毒
• p27蛋白
• 原核表达
• 单克隆抗体 avian leacosis virus
• p27 protein
• prokaryotic expression
• monoclonal antibody

为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析。最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白。经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性。将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株。5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室