构建OGDH基因敲除型SD大鼠模型

作者：蔚丹丹; 李亚青; 李小丽; 曹静; 汲振余; 张明智; 索振河

来源：基础医学与临床, 2016, 36(08): 1068-1073.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2016.08.008

• TALEN基因敲除
• 酮戊二酸脱氢酶
• SD大鼠
• 瓦博格效应

目的构建酮戊二酸脱氢酶(OGDH)基因敲除SD大鼠模型。方法设计、构建TALEN重组子,用荧光素酶活性法筛选出最有效重组子,显微注射法将质粒打入受精卵后测序鉴定。对同一时间点的野生型和基因敲除型大鼠分别进行饮食习惯、活动状态、毛发颜色及质量检测,Western Blot检测两者肝组织OGDH蛋白表达。结果成功构建了靶向OGDH基因的TALEN质粒,并筛选了最有效的TALEN重组子(OGDH-T2),成功培育出杂合子18只,成功率为22.5%,未发现OGDH-KO8纯合子的出生。质量检测显示OGDH-KO8大鼠的质量明显高于野生型,且在第10周时最为显著,增幅率达50.2%(P<0.001),KO组大鼠的OGDH蛋白表达水平显著降低,下降率为50.6%(P<0.01)。结论利用TALEN技术成功构建了OGDH基因敲除型SD大鼠模型。

• 单位
  河南省医药科学研究院; 郑州大学第三附属医院; 郑州大学第一附属医院