他莫昔芬对猪伪狂犬病病毒体外增殖的影响

作者：邢嘉友; 樊文杰; 王昱旻; 鲁秀香; 宋月; 褚贝贝; 王江^*; 王梦迪^*

来源：中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4503-4512.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.11.042

• 他莫昔芬
• 伪狂犬病病毒(PRV)
• 猪肾上皮细胞
• 抗病毒作用

【目的】研究他莫昔芬(Tamoxifen)在PK15细胞模型上对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)感染的抗病毒作用。【方法】以PK15细胞为模型，采用CCK-8细胞计数法检测他莫昔芬对细胞活力的影响；利用ANNEXIN V-FITC/PI凋亡试剂盒检测他莫昔芬对细胞周期和凋亡的影响；利用CytoFLEX流式细胞仪和荧光显微镜检测他莫昔芬处理细胞感染PRV-GFP后病毒增殖的差异；利用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测他莫昔芬处理细胞感染PRV-QXX后PRV gB基因mRNA和蛋白表达水平的变化；利用病毒滴度测定法检测他莫昔芬处理细胞感染PRV-QXX后对病毒的抑制情况。【结果】他莫昔芬用药浓度在6μmol/L时对细胞活力无影响；在6μmol/L以下时，与空白组相比，他莫昔芬处理组对细胞周期与凋亡没有显著影响(P>0.05)。在同一时间点，他莫昔芬处理组PRV-GFP在PK15细胞中的增殖速度极显著低于对照组(P<0.01);实时荧光定量PCR结果表明，他莫昔芬处理后极显著抑制了PRV gB基因mRNA在PK15细胞中的表达(P<0.01);Western blotting结果显示，不同给药浓度同一时间点，他莫昔芬都显著或极显著抑制了PRV gB蛋白的表达(P<0.05;P<0.01);病毒滴度测定结果表明，在PK15细胞中，同一时间点他莫昔芬处理组的PRV-QXX子代病毒的复制速度显著或极显著低于对照组(P<0.05;P<0.01)。【结论】他莫昔芬能显著抑制PRV在PK15细胞中的增殖。

• 单位
  河南牧业经济学院; 食品与生物工程学院; 河南农业大学