丙型肝炎病毒环介导恒温扩增可视化快检方法的应用研究

作者：石洁; 艾俊^*

来源：临床血液学杂志, 2020, 33(12): 859-862.

DOI：10.13201/j.issn.1004-2806-b.2020.12.012

• 丙型肝炎病毒
• 逆转录环介导等温扩增法
• 可视化检测

目的:建立一种环介导等温扩增测定法,以快速,可视化的检测丙型肝炎病毒(HCV)。方法:通过比对分析,选择了高度保守的HCV 5’UTR序列作为设计逆转录环介导等温扩增法(RT-LAMP)引物的合适靶标。确定样品前处理方法,反应体系的最佳条件,进行方法学评价。HCV RT-LAMP分析产物以实时扩增曲线和显色反应呈现。结果:扩增反应在64℃下进行60 min,加入FD染料可以实现反应产物不开盖,肉眼可见。RT-LAMP的结果表明,检测HCV的灵敏度约为50拷贝(200 ag)～500拷贝(2 fg)。HCV与HIV,HBV之间无交叉反应。结论:RT-LAMP测定法具有快速扩增,简单操作和可见检测而无污染的优势。它为评估HCV RT-LAMP在特殊环境和有限资源(如发展中国家的献血检查)中的可行性奠定了基础。

• 单位
  南京红十字血液中心