METTL10表达下调与足细胞损伤的关系

作者：包继文; 李子扬; 尧欢珍; 吴蓓; 周文彦; 顾乐怡; 王玲^*

来源：上海交通大学学报 (医学版), 2021, 41(10): 1290-1296.

DOI：10.3969/j.issn.1674-8115.2021.10.003

• 足细胞损伤
• 蛋白尿
• METTL10
• 差异表达基因

目的·分析足细胞损伤中的差异基因表达,并验证其中关键基因METTL10的蛋白表达。方法·从NCBIGBO数据库下载足细胞损伤相关RNA芯片数据集(GSE108629),包括正常足细胞组(n=4)和损伤足细胞组(n=4);采用limma软件包和affy软件包进行2组间差异表达基因分析,以基因表达倍数变化(fold change,FC)对数的绝对值|log FC|≥2且校正P值(q值)<0.05为筛选条件。收集于上海交通大学医学院附属仁济医院进行肾组织活检并诊断为局灶节段性肾小球硬化或者微小病变的大量蛋白尿患者,以肾组织活检结果为轻微病变或者良性肾小动脉硬化症的患者为对照组;收集患者的基本资料和临床资料,利用免疫荧光染色检测患者肾脏病理标本中METTL10蛋白表达水平。BAL/BC小鼠随机分为2组:阿霉素(adriamycin,ADR)处理组按10 mg/kg尾静脉注射ADR构建小鼠肾病模型(n=6);对照组等体积注射磷酸盐缓冲液(n=6)。利用代谢笼收集小鼠的24 h尿液,分别检测注射前和注射14 d时2组小鼠尿白蛋白肌酐比值(urinary albumin creatinine ratio,UACR);在第15日处死小鼠,收集小鼠肾脏组织标本,通过蛋白印迹法检测ADR诱导小鼠肾病模型中METTL10和足细胞标志物包括synaptopodin、nephrin、podocin和Wilms’ tumor 1 (WT1)的表达水平。结果·在损伤足细胞中发现5 353个差异表达基因(3 402个显著上调,1 951个显著下调),METTL10是其中一个显著下调的基因。免疫荧光检测结果显示METTL10在人正常肾小球组织中表达,并且METTL10与足细胞标志物podocalyxin存在共定位;与对照组相比,METTL10在大量蛋白尿患者肾小球组织中表达明显下降。与对照组相比,注射14 d时ADR处理组小鼠UACR明显升高(P=0.005);蛋白印迹法检测结果显示,与对照组小鼠相比,ADR处理组小鼠肾脏中METTL10表达下调(P=0.001),同时伴随足细胞标志物synaptopodin、nephrin、podocin和WT1表达下降,差异均具有统计学意义(对应P值分别为0.001、0.005、0.000和0.006)。结论·METTL10表达下调可能与足细胞损伤有关。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院