表没食子儿茶素没食子酸酯抑制MAPK/NF-κB通路减轻脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症反应

作者：邹俊; 杜逸亭^*

来源：遵义医科大学学报, 2022, 45(03): 310-316.

DOI：10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2022.0062

• 炎症
• 表没食子儿茶素没食子酸酯
• 丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB通路
• 脂多糖
• RAW264.7细胞

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)调控丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB(MAPK/NF-κB)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症反应的影响。方法 取对数生长期的RAW264.7细胞，随机分为对照组、LPS(1μg/mL)组、LPS+EGCG-L(12.5μmol/L)组、LPS+EGCG-M(25μmol/L)组、LPS+EGCG-H(50μmol/L)组、LPS+DEX(阳性对照，0.5μg/mL)组、LPS+EGCG-H+Anisomycin(300 ng/mL MAPK/NF-κB通路激活剂Anisomycin)组，细胞在添加对应的药物处理1 h后，再加入100μL 1μg/mL LPS,培养24h后，进行后续相关实验。利用倒置显微镜观察各组细胞的形态特征；MTT法检测各组细胞的存活率；Griess法检测各组细胞上清中一氧化氮(NO)含量；ELISA法检测各组细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)的表达；Western blotting检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白及MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达。结果 各组细胞的存活率均大于92%;与对照组比较，LPS组RAW264.7细胞形态呈梭形，细胞中iNOS、COX-2、p-p38、p-IκBα、p-NF-κB蛋白及上清中NO含量、TNF-α、IL-6、IL-1β表达显著升高，IL-10表达显著降低(P<0.05);与LPS组比较，LPS+EGCG-L组、LPS+EGCG-M组、LPS+EGCG-H组、LPS+DEX组对应指标变化与上述相反，且EGCG浓度越高，趋势越明显(P<0.05);Anisomycin可逆转高剂量EGCG对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用。结论 EGCG可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应，该机制与抑制MAPK/NF-κB信号通路有关。

• 单位
  电子科技大学; 成都市妇女儿童中心医院