自噬抑制剂硫酸羟氯喹对去势抵抗性前列腺癌化疗敏感性的影响

作者：张云; 罗萍; 冷平^*

来源：四川大学学报（医学版）, 2019, 50(03): 323-327.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2019.03.006

• 硫酸羟氯喹
• 自噬
• 去势抵抗性前列腺癌
• 化疗敏感性
• 细胞增殖

目的探讨自噬抑制剂硫酸羟氯喹(HCQ)干预自噬对去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞株体内外化疗药多西他赛(DOC)敏感性的影响,及其自噬基因Bcelin-1、自噬特异性底物P62、促凋亡基因Bax mRNA的表达变化与自噬蛋白Bcelin-1、自噬特异性标记物LC3B、促凋亡蛋白Bax表达影响。方法体外培养22RV1细胞株,分别设置空白对照组(不加药物)、DOC组、HCQ(20μmol/L)+DOC组3个组,后两组DOC浓度均为10~(-6) mol/L、10~(-7) mol/L、10~(-8) mol/L,分组培养72 h后CCK-8法检测细胞增殖。于裸鼠皮下一次性注射22RV1细胞悬液,建立22RV1细胞株裸鼠移植瘤,造模成功后随机分为模型组(生理盐水)、DOC组、HCQ+DOC组3个组,每组5只,均为腹腔注射,干预4周。观察移植瘤生长体积的变化。应用实时荧光定量PCR检测22RV1细胞株和移植瘤中自噬和凋亡相关基因(Beclin-1、P62、Bax)以及Western blot检测自噬和凋亡相关蛋白(Beclin-1、LC3B、Bax)的表达水平。结果体外实验中,与空白对照组相比,DOC组和HCQ+DOC组细胞的增殖能力减弱(P<0.05);在同一DOC浓度下,与DOC组相比,HCQ+DOC组细胞的增殖被抑制(P<0.05);HCQ+DOC组DOC的半数抑制浓度较DOC组低。体内实验中,与模型组相比,各时点DOC组及HCQ+DOC组的移植瘤周体积增长值均减小;HCQ+DOC组的同时点周体积增长值均小于DOC组(P<0.05),以第4周最为明显。在体内、外实验中,与其余两组比较,HCQ+DOC组Beclin-1、P62、Bax mRNA和Beclin-1、LC3B、Bax蛋白的表达均出现上调(P<0.05)。结论 HCQ可干预去势抵抗性前列腺癌细胞的自噬,抑制其增殖,增强其对化疗药物的敏感性。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 新桥医院; 成都中医药大学