二甲双胍通过激活Nrf2通路干预PC12细胞H2O2氧化损伤的机制研究

作者：盛琦; 王国涛; 徐道剑^*

来源：浙江中西医结合杂志, 2021, 31(10): 904-908.

• PC12细胞
• 二甲双胍
• Nrf2
• H2O2
• 氧化损伤

目的探讨二甲双胍对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞损伤的保护机制。方法 PC12细胞培养后共设置五组,分别为DMSO组、H2O2组、二甲双胍低(0.5mmol/L)、中(1mmol/L)、高(2mmol/L)剂量组,建立PC12细胞H2O2氧化损伤模型,使用CCK-8法和比色法检测PC12细胞生存率和乳酸脱氢酶(LDH)释放量;采用Hoechst 33342染色法和流式细胞术检测PC12细胞凋亡和活性氧(ROS)水平;qPCR和Western blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路mRNA和蛋白表达水平;使用小干扰RNA沉默Nrf2检测H2O2诱导细胞的保护作用。结果与DMSO组比较,二甲双胍低、中和高剂量对PC12细胞有毒性作用[(99.67±1.53)%、(97.00±3.29)%、(96.10±3.46)%比(100.00±0.00)%,P均<0.05];与H2O2组比较,二甲双胍低、中和高剂量对PC12细胞具有保护作用[(64.33±6.08)%、(67.67±7.51)%、(71.23±5.10)%比(61.00±3.61)%,P均<0.05];与H2O2组比较,二甲双胍高剂量+H2O2组LDH释放量显著降低[(91.67±10.41)比(150.45±10.61),P<0.05],细胞凋亡率下降[(12.33±2.08)%比(23.67±5.13)%,P<0.05],ROS含量减少[(1.77±0.25)%比(3.43±0.40)%,P<0.05];与DMSO组比较,二甲双胍低、中和高剂量显著提高Nrf2和HO-1 mRNA[Nrf2 mRNA:(1.24±0.18)、(1.56±0.23)、(1.93±0.02)比(1.02±0.12),P均<0.05;HO-1 mRNA:(1.83±0.07)、(2.22±0.12)、(2.78±0.09)比(1.46±0.18),P均<0.05]和蛋白[Nrf2蛋白:(0.92±0.12)、(1.24±0.18)、(1.86±0.11)比(0.43±0.05),P均<0.05;HO-1蛋白:(1.29±0.18)、(1.83±0.21)、(2.59±0.06)比(0.62±0.09),P均<0.05]表达;与二甲双胍高剂量+H2O2组比较,二甲双胍高剂量+H2O2+siNrf2组细胞生存率显著降低[(59.77±2.25)%比(78.02±7.63)%,P<0.05]。结论二甲双胍可能通过激活细胞内Nrf2/HO-1通路对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。

• 单位
  台州学院