摘要
利用分枝杆菌对植物甾醇进行边链降解可产生4-AD(4-烯-雄甾-3,17-二酮)和ADD(1,4-二烯-雄甾-3,17-二酮),ADD由4-AD在C1,2位脱氢酶(ksdD)作用下脱氢产生,这两种物质在化学结构上高度相似,难以分离.首先扩增出部分ksdD基因,大小为631bp,并以此为基础构建打靶载体pUC19-MK.将pUC19-MK电转分枝杆菌感受态,通过同源重组敲除分枝杆菌染色体上正常的
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单位生物工程学院; 天津科技大学