摘要
近年来,养殖水环境恶化和养殖密度的提高,病害的发生和非生物的胁迫应激,严重影响着中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的生长和发育。过氧化物还原酶(peroxiredoxin, Prx)在氧化应激应答过程中发挥重要作用。Prx4为Prx家族的重要成员,为了探讨Prx4在中华绒螯蟹抗菌免疫应答中的调控功能,本研究应用同源克隆技术从中华绒螯蟹的肝胰腺中克隆出EsPrx4基因(GenBank No. ON685195)。序列分析表明,EsPrx4的编码区为738 bp,共编码245个氨基酸。理化性质分析表明,EsPrx4蛋白的分子量为27.31 kD,理论等电点为5.55,总平均亲水性为-0.181,表明EsPrx4蛋白为亲水性蛋白。系统进化分析表明,中华绒螯蟹EsPrx4与拟穴青蟹(Scylla paramamosain)、斑节对虾(Penaeus monodon)和南美白对虾(Litopenaeus vannamei)等虾蟹类的Prx4基因具有高度同源性,表明虾蟹中Prx4具有较高的保守性。qPCR结果显示,EsPrx4在中华绒螯蟹体内广泛表达,在肝胰腺中表达量最高,在肠中表达量最低。在鳗弧菌(Listonella anguillarum)刺激下,EsPrx4迅速应答,在24 h表达量达到最高,72 h时恢复至正常水平,表明EsPrx4参与了鳗弧菌刺激引起的反应,在中华绒螯蟹免疫应答中发挥重要作用。本研究为中华绒螯蟹先天免疫和Prx基因家族的深入研究提供理论支持。
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