CaMKⅡ/NFAT通路激活可促进AKI小鼠肾小管上皮细胞凋亡

作者：黄宗顺^*; 肖洁; 彭用华; 俞小敏; 陈亚琦

来源：中国病理生理杂志, 2021, 37(12): 2212-2218.

• 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ
• 活化T细胞核因子
• 急性肾损伤
• 细胞凋亡

目的:研究钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMKⅡ)和活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)是否参与急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTEC)凋亡并探讨其机制。方法:阿霉素(adriamycin,ADR)干预人近端肾小管上皮细胞HK-2建立RTEC凋亡模型,小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默NFAT基因,流式细胞术测细胞凋亡率。ADR干预6～8周龄雌性BALB/c小鼠建立AKI模型,将小鼠分为3组:正常对照组、ADR组和ADR+CaMKⅡ抑制剂KN-93干预组,每组5只。酶联免疫吸附实验检测小鼠血清肌酐浓度。Western blot检测体内外Bax、Bcl-2、p-CaMKⅡ、CaMKⅡ及核NFAT的蛋白水平。结果:与正常对照组相比,ADR干预下,HK-2细胞凋亡率显著升高(P<0.01),小鼠血清肌酐和Bax蛋白表达显著升高,而Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05)。ADR干预下,HK-2细胞和小鼠肾组织中CaMKⅡ活性(p-CaMKⅡ/t-CaMKⅡ)与核蛋白NFAT表达皆显著升高(P<0.01)。ADR干预的HK-2细胞和小鼠中抑制CaMKⅡ活性后,HK-2细胞凋亡率显著降低,小鼠血清肌酐和Bax蛋白表达显著回降,而Bcl-2蛋白表达显著回升,核蛋白NFAT表达显著回降(P<0.05)。此外,用钙调蛋白激活CaMKⅡ后HK-2细胞凋亡率显著升高(P<0.05);激活CaMKⅡ同时予siRNA沉默NFAT,HK-2细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:CaMKⅡ/NFAT通路激活可促进AKI小鼠肾小管上皮细胞凋亡。

• 单位
  广州医科大学附属第一医院