长春花干细胞培养体系的生理生化特征

作者:李海华; 周鹏飞*; 李岩; 兰小群
来源:生物技术, 2022, 32(01): 29-35.
DOI:10.16519/j.cnki.1004-311x.2022.01.0005

摘要

[目的]以脱分化细胞(dedifferentiated cells, DDCs)为参照,研究长春花形成层干细胞(Cambial Meristematic Cell, CMCs)的生理生化特征。[方法]诱导建立长春花CMCs培养体系,显微镜法观察细胞结构和对博来霉素的敏感性,采用HPLC法、分光光度法和Q-PCR法检测生物碱含量及酶基因的表达水平。[结果]长春花CMCs呈小细胞团,对博来霉素的敏感性显著高于DDCs; DDCs中长春质碱、阿玛碱和总生物碱的含量分别为0.0153、0.13和39.8 mg/L,CMCs中的文多灵、长春质碱、阿玛碱和总生物碱含量分别为1.32、0.51、21.5、640.3 mg/L,是DDCs中的16~163倍;CMCs中GES、G10H、SGD、TDC、D4H和ORCA3的表达水平是DDCs中的14~44倍;36个月内CMCs生长和生物碱含量保持稳定。[结论]长春花CMCs具备干细胞特征,生物碱含量高且稳定,为生物合成生物碱提供新的细胞反应器。

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