牛新孢子虫NcSRS2基因腺病毒穿梭载体的构建及在293细胞中的表达

作者：贾立军; 张守发; 刘明明

来源：中国兽医学报, 2012, (02): 220-222+227.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2012.02.018

• 新孢子虫
• NcSRS2基因
• 腺病毒穿梭载体
• 293细胞表达 Neospora caninum
• NcSRS2 gene
• adenovirus shuttle vector
• expression in 293 cells

应用PCR技术扩增牛新孢子虫NcSRS2基因,纯化PCR产物后与克隆载体pMD18-T Simple Vector连接,将PCR、酶切鉴定及测序分析正确的pMD-18T-NcSRS2重组质粒进行EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切,克隆至相同酶切回收后的腺病毒穿梭载体pCR259中,再将PCR、酶切鉴定正确的pCR259-NcSRS2重组质粒转染293细胞,应用IF-AT和Western-blotting技术检测重组质粒在293细胞中的表达情况。结果显示,扩增的牛新孢子虫NcSRS2基因长度为1 227bp,与GenBank中发表的NcSRS2(AF061249)核苷酸序列同源性为99%,构建的pCR2...

• 单位
  延边大学