丝氨酸蛋白酶HtrA2/Omi可参与调节线粒体中的适配蛋白p66Shc

作者：刘姝; 姜长安

来源：中国生物工程杂志, 2012, (09): 9-14.

DOI：10.13523/j.cb.20120902

• HtrA2/Omi
• p66Shc
• 线粒体
• 神经退行性疾病 HtrA2/Omi p66Shc Mitochondria Neurodegenerative disorder

目的:p66Shc在线粒体内积累和HtrA2/Omi的功能缺陷都能导致线粒体损伤,诱导细胞凋亡。探讨在线粒体中HtrA2对p66Shc的调控作用。方法:构建p66Shc和成熟型HtrA2的真核表达质粒,共转染HEK293T细胞,免疫印迹法(Western blot)检测p66Shc蛋白;构建原核表达质粒,大肠杆菌纯化蛋白,体外切割实验,SDS-PAGE分离后考马斯亮蓝染色检测;提取HtrA2功能缺陷小鼠(mnd2)大脑组织的线粒体,检测线粒体内p66Shc的蛋白水平。结果:细胞实验和体外实验证明HtrA2可以切割p66Shc,且在mnd2小鼠大脑中,线粒体内p66Shc的蛋白水平明显升高(P<...

• 单位
  生物治疗国家重点实验室; 四川大学华西医院; 四川大学华西第二医院