CHO细胞表达重组人生长激素-Fc融合蛋白糖基化类型的优化

作者：张凯宁; 刘涵; 朱秋媚; 富锐丽; 刘玉林; 孙瑞欣; 刘景会; 赵竞男; 韩雪容^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(02): 200-206.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003828

• 重组人生长激素-Fc融合蛋白
• CHO-K1细胞
• 糖基化修饰

目的 优化CHO细胞表达重组人生长激素-Fc(recombinant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白，以获得更优的糖基化比例及更低含量的高甘露糖。方法 在7 L生物反应器中培养表达rhGH-Fc的CHO细胞，通过改善补料培养基成分(使用3种商业化培养基：Gly-1:EX-CELL Glycosylation Adjust、Gly-2:SHEFF-CHO PLUS PG ACF、Gly-3:EfficientFeed C+AGT Supplement&GlycanTune C+Total Feed)，对rhGH-Fc糖基化修饰进行调整，并通过质谱分析目的蛋白的糖基化类型及比例。结果 Gly-1、Gly-2、Gly-3的G0F(主要糖型一般为G0、G1和G2,F为岩藻糖)分别为32.89%、58.66%、33.28%,G1F分别为31.39%、18.03%、34.90%,G2F分别为31.39%、18.03%、34.90%,Gly-1与Gly-3使目的蛋白含有更少的G0F及更多的G2F;Gly-3补料方案在高甘露糖修饰方面较其他两种方案更少。结论 Gly-1培养基使糖基化修饰从G0F向G1F、G2F转变，Gly-2培养基使糖基化修饰从G2F、G1F向G0F转变，Gly-3培养基使糖基化修饰从G0F向G1F、G2F转变，且高甘露糖含量在5%以下。Gly-3培养基可能具有更好的修改目的蛋白糖基化类型及比例的效果。

• 单位
  长春理工大学; 长春生物制品研究所; 生命科学技术学院