不同诱导体系体外诱导大鼠骨髓干细胞分化为肝细胞的实验研究

作者:马宏图; 睢凤英; 惠斌; 宋国杰
来源:陕西师范大学学报(自然科学版), 2009, S1: 34-37.
DOI:10.15983/j.cnki.jsnu.2009.s1.007

摘要

模拟体内肝脏发生发育的环境和条件,建立以细胞因子为主的体外诱导培养体系,筛选提高骨髓干细胞体外向肝细胞分化的效率的实验体系.贴壁细胞分离法分离大鼠骨髓干细胞,体外扩增,采用细胞因子诱导骨髓干细胞定向分化为肝细胞.Western-blot检测细胞表面抗原表达,糖原染色法、ALT、AST、尿素合成试验检测细胞的合成和代谢功能.大鼠骨髓干细胞在体外扩增原代可获得0.5×106个细胞,传代可获得3×1012个细胞,各诱导组细胞胞浆内可见红染的糖原颗粒;诱导培养4周,细胞上清尿素合成、ALT、AST水平随诱导时间的延长而增加,于第28天达到高峰.Western-blot检测表明,诱导4 d的细胞开始表达AFP蛋白,7 d后达到高峰.以FGF-4联合HGF因子组诱导后肝细胞特征最显著.以细胞因子FGF-4、HGF、EGF为主的诱导培养体系能促使骨髓干细胞定向分化为肝细胞,其中FGF-4联合EGF细胞因子的应用更能提高骨髓干细胞定向分化为肝细胞的转化效率.

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