摘要

目的 探讨1,25(OH)2D3对过氧化氢(H2O2)刺激的小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)的抗增殖及促凋亡作用,并分析其在Bcl-2/Bax/cleaved caspase-3凋亡机制发挥的调控作用。方法 体外培养小鼠气道平滑肌细胞,再用不同浓度(0、25、50、100μmol/L)的H2O2刺激细胞增殖,作用不同时间(12、24、48、72 h),探索H2O2最佳作用浓度和时间。接着将ASMCs分为对照组、H2O2组、1,25(OH)2D3、H2O2+1,25(OH)2D34组进行培养,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组ASMCs增殖活性的变化,并用流式细胞仪检测其凋亡情况。并用蛋白印迹法检测各组Bax、Bcl-2及cleaved caspase-3蛋白的表达情况。结果 H2O2刺激小鼠气道平滑肌细胞增殖的最佳作用浓度和时间分别为25μmol/L和24 h。1,25(OH)2D3干预能明显降低ASMCs增殖能力,并增加其凋亡率。H2O2+1,25(OH)2D3组细胞凋亡率为21.9%(对照组细胞凋亡率为7.1%,H2O2组细胞凋亡率为4.8%),差异具有统计学意义(P<0.01)。1,25(OH)2D3干预后,蛋白印迹法结果显示ASMCs的Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高,Bcl-2表达水平下降。结论 1,25(OH)2D3能抑制H2O2刺激ASMCs的增殖,并促进其凋亡,其机制与Bax/Bcl-2/ccleaved caspase-3凋亡通路有关。