单纯疱疹病毒胸腺激酶基因系统抑制体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的研究

作者：王继兵; 葛坚; 刘炳乾; 黄冰; 魏雁涛

来源：中华眼科杂志, 2006, (03): 212-217.

DOI：10.3760/j:issn:0412-4081.2006.03.006

• 单纯疱疹病毒属
• 胸苷激酶
• 更昔洛韦
• 眼
• 成纤维细胞 Simplexvirus
• Thymidine kinase
• Ganciclo vir
• Eye
• Fibroblasts

目的研究单纯疱疹病毒胸腺激酶(HSV-tk)基因系统对人眼球筋膜囊成纤维细胞(HTFs)增殖的抑制作用及其作用机制。方法构建含HSV-tk基因的逆转录病毒载体pL(tk)SN并转入包装细胞系PT67进行病毒包装,G418筛选抗性克隆并扩大培养收集病毒上清,测定病毒滴度。透射电镜观察鉴定病毒颗粒;聚合酶链反应(PCR)技术鉴定tk基因在病毒基因组中的整合。用病毒感染HTFs细胞,G418筛选并扩大培养,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫印迹法检测tk基因的表达;加不同浓度前药更昔洛韦(GCV)后,以MTT法检测tk基因对HTFs细胞增殖的抑制作用;采用Hoechst33258染色及流式...

• 单位
  中山大学中山眼科中心