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摘要
目的：基于转录组学分析中药党参对UC大鼠结肠组织基因差异表达的影响，确证PI3K/ AKT信号通路在党参干预UC中通路富集基因的差异化表达。方法：SD大鼠随机分为正常对照组和造模组，采用2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）-乙醇复合方法制备UC模型；造模成功大鼠随机分为模型对照组、柳氮磺吡啶组（柳氮磺吡啶0.3 g/kg）组、党参4.5、9、18 g/kg组，药物连续干预7 d后收集各组大鼠血清、结肠组织，计算疾病活动指数（DAI），HE染色观察大鼠结肠黏膜损伤评分并计算结肠指数；Elisa法检测血清白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、降钙素（PCT）、C-反应蛋白（CRP）含量；转录测序分析正常对照组、模型对照组、党参18 g/kg组大鼠结肠组织差异表达基因，进行基因本体（GO）分析及基因组百科全书（KEGG）富集分析可能的信号通路通路；蛋白免疫印迹（WB）检测结肠组织Akt、PI3K蛋白表达；qRT- PCR法检测结肠组织蛋白激酶B（Akt）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）、IV型胶原a6蛋白（Col4a6）、层粘连蛋白α2（Lama2）、神经生长因子（Ngfr）、层粘连蛋白γ3亚基（Lamc3）、层粘蛋白β（Lamb2）、氨基酸整合素亚基α7（Itga7）、溶血磷脂酸受体3（Lpar3）、酪氨酸激酶受体Eph亚族（Efna1）、催乳素受体（Prlr）、3’-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（Pdpk1）和细胞周期蛋白D1（Ccnd2）mRNA表达。结果：与正常对照组比较，模型对照组大鼠体质量显著降低，结肠长度显著缩短，疾病活动指数、结肠指数、结肠组织病理评分显著升高（P＜0.01）；受试药物组大鼠体质量显著升高（P＜0.01），结肠长度明显增加，疾病活动指数、结肠指数、结肠组织病理评分明显降低（P＜0.01或P＜0.05）。模型对照组与正常对照组的 4 727个差异基因及受试药物组与模型对照组的1 058个差异表达基因均显著富集于PI3K/Akt信号通路 ，其中Col4a6、Lama2、Ngfr、Lamc3、Lamb2、Itga7、Lpar3、Efna1、Prlr、Pdpk1、Ccnd2是富集于PI3K/Akt信号通路的显著差异表达基因。与正常对照组比较，模型对照组血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PCT、CRP含量显著升高（P＜0.01），结肠组织PI3K、 Akt蛋白表达显著上调（P＜0.01），PI3K 、Akt、 Pdpk1、Ccnd2基因表达显著上调（P＜0.01），Col4a6、Lama2、Ngfr、Lamc3、Lamb2、Itga7、Lpar3、Efna1、Prlr基因表达显著下调（P＜0.01）；与模型对照组比较，受试药物组血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PCT、CRP含量显著降低（P＜0.01），结肠组织PI3K、Akt蛋白表达明显下调（P＜0.05或P＜0.01），PI3K 、Akt、 Pdpk1、Ccnd2基因表达明显下调（P＜0.05或P＜0.01），Col4a6、Lama2、Ngfr、Lamc3、Lamb2、Itga7、Lpar3、Prlr基因表达明显上调（P＜0.05或P＜0.01）。结论：党参可能通过抑制PI3K/Akt信号通路，调控Col4a6、Lama2、Ngfr、Lamc3、Lamb2、Itga7、Lpar3、Efna1、Prlr、Pdpk1、Ccnd2基因发挥治疗UC的作用，运用转录组学技术发现差异基因为揭示中药党参治疗UC的机制提供了新的研究视角。
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