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摘要
[目的]建立迅速、特异的水质中大肠杆菌群荧光定量PCR检测方法。[方法]根据Genbank中大肠杆菌保守的uida基因序列,设计特异性引物,扩增并构建重组质粒作为标准品。同时设计荧光定量PCR引物,优化荧光定量PCR定量反应体系,建立水质中大肠杆菌的绝对定量方法。[结果]成功地构建了含uida基因的重组质粒,利用标准质粒为参照,分别对不同来源的水质进行检测,成功检出每微升水质中大肠杆菌的基因拷贝数,且方法具有特异性好、重复性高的特点。[结论]初步建立水质中大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法,可为饮用水中大肠杆菌迅速检测,包括污染源头诊断的标准方法的确立提供依据。
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单位浙江中医药大学; 生命科学学院
