摘要
根据蝴蝶兰低温转录组测序结果克隆得到1个PP2A基因,其cDNA开放阅读框(ORF)长度为1764bp,编码一个含有587个氨基酸的蛋白,将该基因命名为PhPP2Aa,GenBank登录号为MW847782。序列分析表明,该基因与其他植物PP2A核苷酸序列相似性均在80%以上,氨基酸序列与小兰屿蝴蝶兰PP2A序列相似性为99.66%。基于氨基酸序列进化分析表明,蝴蝶兰PhPP2Aa与小兰屿蝴蝶兰和铁皮石斛的亲缘关系最近。将蝴蝶兰PP2A与其他7种候选内参基因(TUA、TUB、ACTIN、F-box、RPL19、RPL36及RPL41)进行实时荧光定量PCR,用三种常用内参基因分析软件对各个基因Ct值进行稳定性分析,结果表明蝴蝶兰8个候选内参基因在低温胁迫条件下表达水平最稳定的内参基因为PP2A,其次为ACTIN;最不稳定的基因为F-box,其次为TUA。以蝴蝶兰PP2A作为内参基因探讨低温胁迫响应基因PhNAC1的表达情况,结果显示蝴蝶兰PhNAC1的表达模式符合低温胁迫条件下的表达特性。研究结果表明蝴蝶兰PhPP2Aa基因可以作为低温胁迫条件下目的基因转录水平研究的内参基因。
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单位郑州师范学院