miRNA103在高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化中的作用

作者：何雷; 徐金升^*; 白亚玲; 张慧然; 周薇; 张胜雷; 刘兰; 张彤彤

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(01): 50-55.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.01.009

• 血管平滑肌细胞
• β-甘油磷酸盐
• 表型转化
• 血管钙化
• miR-103

目的观察微小RNA103 (micro RNA103,miR-103)在高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化过程中的作用及机制。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,将VSMCs随机分为正常组和高磷(HP)组(给予10 mmol/Lβ-甘油磷酸盐刺激),刺激4 d后,收集细胞。采用ELISA法测定VSMCs中碱性磷酸酶(ALP)的活性变化;采用邻甲酚酞络合酮比色法及茜素红染色检测VSMCs的钙化情况;采用qPCR测定VSMCs中miR-103及成骨转录因子Runx2的表达情况,Western blot检测Runx2蛋白表达情况。为进一步验证miR-103对VSMCs的作用,将细胞分为6组:正常组、NC inhibitor组、miR-103 inhibitor组、高磷组、NC mimic+HP组、miR-103 mimic+HP组,测定各组VSMCs钙化情况以及Runx2表达和ALP活性的变化。结果与正常组比较,高磷组大鼠VSMCs钙化增加(P <0.05),Runx2表达及ALP活性显著升高(P <0.05),而miR-103 RNA水平显著降低(P <0.05)。转染miR-103 inhibitor后,与正常组和NC inhibitor组比较,miR-103 inhibitor组VSMCs钙化增加,Runx2表达及ALP活性显著升高(均P <0.05);转染miR-103 mimic后,与高磷组和NC mimic+HP组比较,miR-103 mimic+HP组VSMCs钙化减少,Runx2表达及ALP活性显著降低(均P <0.05)。结论高磷可能是通过抑制miR-103表达,促进VSMCs表型转化,从而诱导VSMCs钙化。

• 单位
  河北医科大学第四医院