人嗅觉黏膜间充质干细胞来源的外泌体促进内皮细胞的血管生成

作者：葛丽特; 寻成峰; 卓毅; 金圣榆; 陈伟; 李文水; 黄雁; 段答; 陈平^*; 卢明^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2020, 36(01): 103-109.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.12.1333

• 间充质干细胞
• 嗅黏膜
• 外泌体
• 内皮细胞
• 血管新生

外泌体作为是细胞旁分泌的重要介质,在促血管形成方面有重要作用。在我们前期研究中,已经成功从嗅黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells,OM-MSCs)分离、鉴定了其外泌体,然而,OM-MSCs源外泌体对血管生成的影响尚不清楚。本研究旨在探讨OM-MSCs来源外泌体对内皮细胞血管生成能力的影响。采用PKH67荧光标记OM-MSCs源外泌体,与人脑微血管内皮细胞(human brain microvessel endothelial cells,HBMECs)共培养,观察OM-MSCs外泌体能否进入HBMECs。采用CCK-8法、Transwell迁移实验和小管实验,观察OM-MSCs外泌体对HBMECs增殖、迁移及管状结构形成的影响。采用基质胶塞实验及CD31免疫荧光,观察OM-MSCs外泌体在体内对血管生成的影响。上述研究均以等量PBS作为对照。结果提示,OM-MSCs外泌体可被HBMECs摄取。CCK-8法检测显示,在处理1、2、3、4、5 d各时间点,实验组细胞增殖均优于对照组(1. 32±0. 14 vs. 0. 98±0. 04,1. 36±0. 14 vs.1. 04±0. 06,1. 75±0. 18 vs.1. 33±0. 11,2. 16±0. 11 vs.1. 50±0. 19,2. 71±0. 11 vs. 1. 81±0. 20,P<0. 01)。Transwell实验结果显示,实验组跨膜迁移细胞吸光度值较对照组显著增多(1. 12±0. 05 vs.0. 02±0. 02,P<0. 05)。在体外小管实验中,从节点、交叉点、网眼数、血管分支数和总长度5个方面,实验组均高于空白对照组(374. 33±127. 74vs. 193. 33±44. 79,104. 56±33. 07 vs. 54. 33±11. 65,20. 11±11. 20 vs. 7. 56±3. 64,81. 67±19. 07 vs.57. 00±13. 02,11466. 22±2781. 03 vs. 8544. 00±1848. 61,P <0. 05);在体内实验中,实验组成血管及CD31阳性率(%)亦显著高于对照组(85. 00±5. 57 vs.8. 00±2. 08,P<0. 05)。本研究表明:OMMSCs外泌体可促进HBMECs增殖、迁移及管样结构形成,提示OM-MSCs外泌体可促进血管新生。

• 单位
  湖南师范大学; 生命科学学院; 湖南师范大学第二附属医院