摘要
目的 探讨尿液外泌体miRNA-22在糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)中的水平变化及其与足细胞损伤、病情严重程度的关系。方法 纳入2017-01/2019-01月于作者医院就诊的100例2型糖尿病合并DN患者(DN组),以同期来作者医院进行健康体检的30例健康人群作为对照组。收集研究者尿液并提取外泌体,蛋白质印迹法(Western blot)检测尿液中外泌体标志物溶酶体颗粒糖蛋白(lysosome intact membrane protein, CD63),采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测外泌体miRNA-22水平,Western blot检测nephrin蛋白水平,鉴定尿液中外泌体,比较DN组与对照组外泌体miRNA-22及nephrin蛋白水平。根据尿微量白蛋白定量指标将患者分为微量白蛋白尿组(n=50)和大量白蛋白尿组(n=50),比较微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组外泌体miRNA-22及nephrin蛋白水平,Pearson相关性分析法评价外泌体miRNA-22与nephrin蛋白水平的相关性,Spearman相关分析评价外泌体miRNA-22与DN病情严重程度的相关性。结果 通过透射电子显微镜在尿液中观察到直径40~100 nm的圆形结构,并且DN组中外泌体表面标志蛋白CD63的表达显著高于对照组(P<0.05);与对照组比较,DN组外泌体miRNA-22相对表达量升高(P<0.05),nephrin蛋白水平降低(P<0.05)。与微量白蛋白尿组比较,大量白蛋白尿组外泌体miRNA-22相对表达量升高(P<0.05),nephrin蛋白水平降低(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,外泌体miRNA-22与nephrin蛋白水平呈负相关(r=-0.769,P<0.05),Spearman相关性分析结果显示,外泌体miRNA-22与DN患者Mogensen分期呈正相关(r=0.815,P<0.05)。结论 miRNA-22可能参与了DN的发生发展,尿液外泌体miRNA-22与nephrin蛋白水平呈负相关,可反映足细胞损伤状态,且外泌体miRNA-22与DN患者Mogensen分期呈正相关,外泌体miRNA-22可反映病情严重程度。
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