Survivin反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞凋亡的诱导效应

作者：高大新; 张海燕; 杨向红; 黄涛; 王岩峰; 吕刚

来源：中国病理生理杂志, 2006, (03): 495-500.

DOI：10.3321/j.issn:1000-4718.2006.03.019

• 寡核苷酸类,反义
• 基因,survivin
• 骨肉瘤
• 细胞凋亡

目的:利用骨肉瘤OS-732细胞,探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对survivin基因表达的影响及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应。方法:设计合成特异性靶向survivin的ASODN,以不同浓度和时间对OS-732细胞进行转染,并设空白、正义(SODN)对照组进行比较。采用RT-PCR、Westernblotting、免疫细胞化学技术检测各组OS-732细胞中survivinmRNA、蛋白表达状态,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡水平和形态变化,MTT法检测细胞生长抑制情况,激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活性程度。结果:转染ASODN各组OS-732细胞survivinmRNA和蛋白表达均明显弱于空白对照组、SODN组;细胞凋亡率(AI)显著增加,细胞生长相应受抑,caspase-3活性显著提高;上述效应在ASODN各组存在一定的时间浓度依赖性;而SODN各组与空白对照组间各项指标均无明显差异。结论:ASODN能够特异性下调OS-732细胞中survivin基因表达,激活凋亡效应蛋白酶caspase-3,在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。

• 单位
  基础医学院; 中国医科大学; 辽宁沈阳; 中国医科大学附属第一医院