灵芝酸D通过调控p53/Bax通路对人结直肠肿瘤细胞的作用机制研究

作者：包翔; 朱倩影; 汤汇涓; 孙洁; 张波^*

来源：中国临床药理学杂志, 2022, 38(12): 1339-1343.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.12.010

• 结直肠癌
• 灵芝酸D
• 蛋白53/B淋巴细胞瘤-2通路
• 细胞凋亡
• 细胞活性

目的 探究灵芝酸D(GAD)对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组：空白对照组(完全培养基)、低(5μmol·L-1 GAD)、中(10μmol·L-1 GAD)、高(20μmol·L-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL-1 Pifithrin-α+20μmol·L-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖能力，用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性，用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53(p53),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为(96.33±2.62)%,(95.00±1.63)%,(70.33±5.91)%和(49.00±3.56)%;4组Caspase-9酶活性分别为97.6±3.6,94.7±2.6,175.6±7.8和261.8±15.3;Caspase-3酶活性分别为98.3±3.4,96.8±4.2,246.8±25.6和393.7±40.5;这4组p53蛋白的相对表达水平分别为0.53±0.03,1.15±0.09,1.61±0.23和2.69±0.17;这4组Bax蛋白的相对表达水平分别为0.42±0.12,1.07±0.04,1.51±0.25和2.33±0.31;这4组Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为1.00±0.16,0.98±0.04, 0.74±0.10和0.26±0.09。上述指标，高剂量实验组与空白对照组比较，差异均有统计学差异(均P<0.05)。空白对照组、Pifithrin-α组、高剂量实验组及联合组的细胞活性分别是(98.00±1.63)%,(102.33±2.49)%,(45.67±7.04)%和(69.67±5.25)%;这4组的Bax蛋白的相对表达水平分别为0.40±0.05,0.35±0.06,0.87±0.17和0.53±0.09;以上指标，高浓度实验组与空白对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05),联合组与高浓度实验组相比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 GAD通过调控p53/Bax信号通路诱导结直肠癌细胞的凋亡。

• 单位
  江苏省中医院; 东南大学附属中大医院; 南京中医药大学; 第一临床医学院