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摘要
丝氨酸整合因子5（Serinc5）是最新报道能够被携带到病毒粒子中的宿主限制性因子,具有抵抗人类免疫缺陷病毒I型（HIV-1）感染性的作用。与人Serinc5（hSerinc5）具有高度同源性的犬Serinc5存在两种形式,一种为全长基因组编码的犬Serinc5（cSerinc5）,另一种为转录剪接体（cSerinc5X2）,该剪接体在N端缺少137位氨基酸。为鉴定这两种犬Serinc5是否具有抑制HIV-1的复制能力,本研究从犬肾细胞系MDCK中提取犬总RNA,经RT-PCR分别扩增两种犬Serinc5的cDNA,并克隆到pcDNA3.1载体中,构建编码两种犬Serinc5的重组质粒。将这两种重组质粒分别与编码HIV-1野生型或Nef缺失型的质粒共转染293T细胞,收获所产生的HIV-1病毒粒子,通过ELISA方法检测到这两种犬Serinc5对HIV-1病毒粒子的产量无影响。进一步将病毒粒子分别感染TZM-bl细胞,通过荧光强度检测结果显示,与对照组相比,cSerinc5X2对HIV-1感染性无显著抑制作用,而携带cSerinc5的HIV-1感染性与携带cSerinc5X2的病毒和对照组相比降低约9倍（p<0.01）,表明cSerinc5的N端对于病毒感染活性的抑制具有关键作用。本研究为鉴定Serinc5抗病毒的功能区提供实验依据。
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单位中国农科院; 美国密歇根州立大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
