‘伏令夏橙’原位转化体系的建立及优化

作者：谢幸男; 杨莉; 刘范; 田娜; 车婧如; 靳三鹏; 张永艳^*; 程春振^*

来源：园艺学报, 2020, 47(01): 111-119.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2019-0130

• 橙
• 原位转化
• 苗龄
• 外植体
• 转化效率

以‘伏令夏橙’实生苗为材料进行原位转化体系建立及优化。首先,研究侵染部位对原位转化效率的影响:使用带有PBI121载体的农杆菌分别侵染5周龄‘伏令夏橙’实生苗上胚轴切口、顶芽切口(保留/去除真叶)2次,共培养3d后进行抗性筛选及暗处理,7周后提取叶片DNA用于转基因植株PCR鉴定;之后,以上胚轴切口作为侵染部位进一步研究苗龄对原位转化效率的影响。研究结果表明,5周龄上胚轴切口再生率为93.10%,转化率为20.68%;保留/去除真叶后侵染顶芽时,再生率分别为81.74%和94.55%,转化率分别为19.09%和17.82%;4周龄和6周龄上胚轴切口再生率为94.59%和91.50%,转化率为25.42%和19.36%。可见利用农杆菌介导的遗传转化法原位转化4周龄‘伏令夏橙’的上胚轴切口可获得较高的转化效率。原位转化操作简单、周期短、转化率高,在甜橙遗传育种研究中具有重要的应用价值。

• 单位
  福建农林大学