双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因

作者：陆芸; 王若南; 谢国良; 余斐; 郑书发; 陈晓

来源：中国微生态学杂志, 2017, 29(05): 591-597.

DOI：10.13381/j.cnki.cjm.201705024

• 志贺毒素
• stx1
• stx2
• 实时荧光定量PCR

目的建立一种双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因的方法。方法根据不同细菌来源的stx1和stx2序列,设计PCR引物和TaqMan探针,建立双重实时荧光定量PCR检测体系,进行灵敏度、特异性和重复性评价,并对腹泻患者粪便样本进行检测分析。结果双重实时荧光定量PCR检测含志贺毒素基因重组质粒的最低检测下限为102 copies/mL;该法对12种常见肠道病原菌均无特异性扩增,对不同浓度的标准质粒检测重复性高,Ct值变异系数均小于10%;对急性腹泻粪便标本的检测阳性率高于细菌分离培养。结论建立的双重实时荧光定量PCR可作为不同细菌来源的志贺毒素基因的快速鉴定方法,亦可用于人感染性腹泻标本的快速筛查。

• 单位
  传染病诊治国家重点实验室; 浙江大学医学院附属第一医院; 浙江大学; 浙江大学医学院附属儿童医院