摘要

目的:基于NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化探讨"三色散"挥发油减轻膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法:采取水蒸气蒸馏法提取"三色散"挥发油,采用气质联用(GC-MS)技术分析其组成。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLS),采用CCK-8法检测10、25、50、100、250、500、1 000μg/mL"三色散"挥发油对FLS存活率的影响;以脂多糖诱导12 h建立KOA炎症细胞模型,检测10、250μg/m L"三色散"挥发油对炎症模型细胞中NLRP3、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白及其mRNA相对表达量的影响,检测炎症模型细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平。结果:提取得到黄色澄清且有独特芳香气味的"三色散"挥发油0.51~0.61 g,提取率为0.33%~0.41%(n=9)。从该挥发油中共分离得到化学成分41种,鉴定了其中的30种,其峰面积之和占总峰面积的90.073 6%;相对含量较高的成分依次为芳姜黄酮(17.573 9%)、δ-杜松烯(15.434 5%)、姜黄酮(11.509 5%)等。当"三色散"挥发油质量浓度为10~250μg/mL时,其对FLS存活率均无显著影响(P>0.05)。与空白组比较,模型组细胞中NLRP3、caspase-1、ASC的蛋白及其mRNA相对表达量以及细胞上清液中IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,"三色散"挥发油10、250μg/m L组细胞及上清液中上述指标的相对表达量或水平均显著降低(P<0.05)。结论:"三色散"挥发油可能通过抑制FLS中NLRP3炎症小体的活化而减少下游炎症级联反应,从而发挥其改善KOA滑膜炎症的作用。