摘要
2020年从黑龙江省某猪场的流产胎儿采集病料,经预处理后,接种猪肾原代细胞,能产生明显的致细胞病变作用。经过血凝活性、病毒含量、荧光抗体检查、电镜观察、分子生物学等项测定,证明分离的病毒为猪细小病毒(PPV)。该病毒的HA效价≥1:256,TCID50≥107.0,呈PPV特异性荧光,电镜观察到呈六角形或圆形、无囊膜、直径20 nm左右的病毒粒子,可以被PPV特异性抗血清中和,PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,出现一条445bp特异性电泳条带,并与7909株相符。对其进行了VP2基因克隆和测序,序列分析表明,VP2基因片段与其它PPV毒株的VP2基因片段的核苷酸同源性均在99%以上,氨基酸同源性在98%以上。其与NADL-2株和China株的亲缘关系最近。毒株耐热,对胰蛋白酶有抵抗力,对乙醚、氯仿不敏感,p H3~9,病毒稳定,该毒株纯净,无外源病毒污染。本研究为该病疫苗的研发奠定了基础。
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单位哈药集团生物疫苗有限公司