一种高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌的构建研究

作者：夏树立; 韩静; 王丽学; 杨春蕾; 刘长悦; 王海亮; 吴贶; 史慧玲^*

来源：中国农学通报, 2020, 36(30): 98-105.

• 辣椒高赖氨酸基因
• 枯草芽孢杆菌
• 基因克隆
• 同源交换
• HPLC

为了选育一种非抗性、高产出、遗传稳定性好、低生产成本的L-赖氨酸生产菌株,以辣椒花药和枯草芽孢杆菌为试验材料,以穿梭表达载体pHT43和基因敲除载体pK18mobsacB为媒介,将辣椒花药中的高赖氨酸基因CFLR转化到枯草芽孢杆菌中。经过2次细胞内同源交换和培养基筛选,最终获得不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,该菌株连续传代20次后仍具有明显高于野生型的CFLR基因拷贝数,经HPLC验证,重组菌株L-赖氨酸含量比野生菌株提高了64.89%。结果表明,本研究所构建的非抗性高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株产量高、遗传稳定性好、低纯化成本,具有良好的应用潜力。

• 单位
  天津市畜牧兽医研究所; 天津市农业科学院